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FITC標記細胞凋亡檢測試劑盒Annexin V-FITC（Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit）是用FITC標記的重組人Annexin V來(lái)檢測細胞凋亡時(shí)出現在細胞膜表面的磷酯酰絲氨酸的一種細胞凋亡檢測試劑盒?？梢允褂昧魇郊毎麅x、熒光顯微鏡或其它熒光檢測設備進(jìn)行檢測。
Annexin是一類(lèi)廣泛分布于真核細胞細胞漿內鈣離子依賴(lài)的磷酯結合蛋白，參與細胞內的信號轉導。但僅Annexin V被報道可以調控一些PKC的活性。
FITC標記細胞凋亡檢測試劑盒Annexin V-FITC

Annexin V選擇性結合磷酯酰絲氨酸（phosphatidylserine，簡(jiǎn)稱(chēng)PS）。磷酯酰絲氨酸主要分布在細胞膜內側，即與細胞漿相鄰的一側。在細胞發(fā)生凋亡的早期，不同類(lèi)型的細胞都會(huì )把磷酯酰絲氨酸外翻到細胞表面，即細胞膜外側。磷酯酰絲氨酸暴露到細胞表面后會(huì )促進(jìn)凝血和炎癥反應。而Annexin V和外翻到細胞表面的磷酯酰絲氨酸結合后可以阻斷磷酯酰絲氨酸的促凝血和促炎癥反應活性。
用帶有綠色熒光的熒光探針FITC標記的Annexin V，即Annexin V-FITC，就可以用流式細胞儀或熒光顯微鏡非常簡(jiǎn)單而直接地檢測到磷酯酰絲氨酸的外翻這一細胞凋亡的重要特征。
本試劑盒還提供了碘化丙啶染色液，碘化丙啶可以染色壞死細胞或凋亡晚期喪失細胞膜完整性的細胞，呈現紅色熒光。對于壞死細胞，由于細胞膜的完整性已經(jīng)喪失，Annexin V-FITC可以進(jìn)入到細胞漿內，與位于細胞膜內側的磷酯酰絲氨酸結合，從而也使壞死細胞呈現綠色熒光。
綜上所述，參考下圖，用Annexin V-FITC和碘化丙啶染色后，正常的活細胞不被Annexin V-FITC和碘化丙啶染色（下圖左下角）；凋亡早期的細胞僅被Annexin V-FITC染色，碘化丙啶染色呈陰性（下圖右下角）；壞死細胞和凋亡晚期的細胞可以同時(shí)被Annexin V-FITC和碘化丙啶染色（下圖右上角）。下圖左上角出現的是許可范圍內的檢測誤差。

包裝清單：

保存條件：
4℃保存，Annexin V-FITC和碘化丙啶染色液需避光保存，半年有效。為長(cháng)期保存，可以把碘化丙啶染色液適當分裝后-20℃保存，Annexin V-FITC結合液可以直接-20℃保存。
注意事項：
如果有細菌或真菌污染，會(huì )嚴重影響檢測效果。
染色后宜盡快檢測，時(shí)間過(guò)長(cháng)可能會(huì )導致凋亡或壞死細胞的數量增加。
如果細胞收集過(guò)程中使用了胰酶，需注意設法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會(huì )消化并降解Annexin V-FITC，zui終導致染色失敗。
熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅，在進(jìn)行熒光觀(guān)察時(shí)，盡量縮短觀(guān)察時(shí)間，同時(shí)在操作和存放過(guò)程中也盡量注意避光保存。
需自備PBS。
為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗服并戴一次性手套操作。

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