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人HE4測定試劑盒96T（酶聯(lián)免疫吸附法）

人HE4測定試劑盒96T（酶聯(lián)免疫吸附法）

實(shí)驗原理
HE4 EIA是一種非競爭性的夾心酶聯(lián)免疫方法。它通過(guò)兩種小鼠單克隆抗體，即2H5和3D8，直接針對于HE4結構域中C-WFDC的兩個(gè)抗原決定簇位點(diǎn)。操作時(shí)將標準品、質(zhì)控品及患者標本和生物素標記的抗HE4鼠單克隆抗體（MAb）2H5滴加至鏈霉親和素包被的微孔板中一起溫育。在溫育過(guò)程中，標準品或患者標本中存在的HE4抗原通過(guò)生物素標記的抗HE4單克隆抗體（MAb）吸附到鏈霉親和素包被的微孔板上。隨后清洗微孔
板，加入HRP標記的抗HE4單克隆抗體3D8進(jìn)行溫育反應。經(jīng)過(guò)第二次清洗后，向每孔加入底物/顯色緩沖液（過(guò)氧化氫和3,3',5,5'四甲基聯(lián)苯胺）使其發(fā)生酶促反應。在酶促反應過(guò)程中如果抗原存在則會(huì )顯示為藍色。其顏色的深度與標本中HE4的含量呈正比。微板孔中顏色的深度可用酶標儀在620nm （也可選擇加入終止液后在405 nm ）進(jìn)行檢測。
每次試驗后均需根據每個(gè)標準品的濃度與其相對應的吸光度數值繪制標準曲線(xiàn)，患者標本中的HE4濃度即可從標準曲線(xiàn)上讀出。

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