Thermo Pierce™ 磁性 ChIP 試劑盒 分子生物試劑
Thermo Pierce™ 磁性 ChIP 試劑盒
Thermo Scientific Pierce 磁性 ChIP 試劑盒提供了一種通過(guò)免疫沉淀(染色質(zhì) IP)高效分離染色質(zhì)結合 DNA 的便利方法,用于隨后通過(guò) PCR 進(jìn)行定量分析。
磁性 ChIP 試劑盒的特點(diǎn):
•快速— 可在約 8 小時(shí)內獲得適于進(jìn)行定量 PCR 的純化 DNA
•高效且可重現—微球菌核酸酶酶切過(guò)程和細胞核裂解過(guò)程均經(jīng)高度優(yōu)化
•靈敏—只需 10,000 個(gè)細胞 (1 x 10^4) 即可獲得結果
•低背景—Pierce 蛋白 A/G 磁珠已在不含 DNA 的試劑中進(jìn)行封閉,可極大限度地降低背景
•全面—包括優(yōu)化的陽(yáng)性對照試劑:RNA 聚合酶 II 抗體和 GAPDH 啟動(dòng)子 PCR 引物
Pierce 磁性染色質(zhì)免疫沉淀分析 (ChIP) 試劑盒含有足夠的試劑,可使用優(yōu)化的方案采用適當對照品進(jìn)行 30 次 ChIP 檢測。試劑盒中包含的試劑可用于裂解細胞、捕獲蛋白-DNA 復合物,逆轉交聯(lián)以及分離 DNA。封閉 Pierce 蛋白 A/G 磁珠具有ji高的結合容量和較低的非特異性背景,可與很多種抗體一起使用。這些微珠可與磁力架或自動(dòng)化平臺(例如,Thermo Scientific KingFisher 儀器)一起用于手動(dòng)工作流程。還提供經(jīng)驗證適用于 ChIP 且具備質(zhì)量保證的抗體,與 Pierce 磁性 ChIP 試劑盒配合使用。
包括:
試劑盒含有用于染色質(zhì)制備、IP 以及 DNA 純化的試劑,同時(shí)也包含陽(yáng)性對照品(抗體和引物)
需要:
體內交聯(lián)劑(如甲醛)、微量吸頭超聲波儀(如 Misonix™ 超聲波儀 3000)、符合 ChIP 要求的首xuan抗體、目標 DNA 序列的 PCR 引物、PCR 預混液(如果需要 qPCR,則含有一種染料,如 SYBR™ Green)和 qPCR 儀器
應用:
• 通過(guò) PCR 或 ChIP-Seq 確定基因組 DNA 上特異性蛋白-DNA 相互作用的位點(diǎn)
• 監測組蛋白修飾或化學(xué)制劑對 DNA 結合的影響
要想成功進(jìn)行 ChIP 檢測,需要在檢測靶標基因組 DNA 之前執行多個(gè)關(guān)鍵步驟(交聯(lián)、染色質(zhì)制備、免疫沉淀)。單獨來(lái)講,ChIP 實(shí)驗方案中的每一步在優(yōu)化時(shí)都很費時(shí)間。Thermo Scientific Pierce 磁性 ChIP 試劑盒簡(jiǎn)化了 ChIP 流程,可獲得準確且可重現的結果。
蛋白-DNA 復合物首先在體內與甲醛交聯(lián)。試劑盒含有的試劑可以裂解細胞,并可提取和溶解交聯(lián)復合物。然后,將復合物和特異性抗體放在一起進(jìn)行孵育,最后用 Pierce 蛋白 A/G 磁珠進(jìn)行分離。在逆轉交聯(lián)和酶切蛋白后,純化所得 DNA 片段,然后準備進(jìn)行標準或定量 PCR。
Thermo Pierce™ 磁性 ChIP 試劑盒