QIAamp RNA Blood Mini Kit全血RNA分離純化試劑盒
QIAamp RNA Blood Mini Kit全血RNA分離純化試劑盒
從新鮮的全血樣本中純化胞內RNA
QIAamp RNA Blood Mini Kit全血RNA分離純化試劑盒
訂購信息:
Cat No./ID: 52304
QIAamp RNA Blood Mini Kit (50)
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For 50 RNA preps: 50 QIAamp Mini Spin Columns, 50 QIAshredder Spin Columns, Collection Tubes (1.5 ml and 2 ml), RNase-free reagents and buffers
可靠的RT-PCR分析。
血液中的總RNA的RT-PCR。使用QIAamp RNA Blood Mini Kit從50 µl健康的人全血(含有抗凝劑)中純化總RNA,使用50 µl不含RNA酶的水洗脫。對于每個(gè)樣本,使用5 µl或15 µl洗脫液或對照(15 µl洗脫液,未進(jìn)行RT)進(jìn)行三次RT-PCR反應(從左至右)。進(jìn)行RT-PCR時(shí),使用不含RNA酶的DNA酶酶切樣本并使用oligo-dT引物進(jìn)行逆轉錄。使用GAPDH引物擴增1/10(2.5 µl)的cDNA。每個(gè)泳道上樣1/5的PCR反應產(chǎn)物。–:按上述步驟進(jìn)行PCR,但以蒸餾水代替洗脫液;+:陽(yáng)性對照cDNA片段。M:100 bp DNA分子量標準。
Performance
QIAamp純化流程可*去除RNases、污染物和酶抑制劑,制備的高品質(zhì)RNA適用于多種下游應用(參見(jiàn)"High-quality RNA for northern analysis"和"Reliable RT-PCR analysis")。
QIAamp RNA Blood Mini Kit制備的RNA品質(zhì)高,含有zui少量的DNA。RNA的純化不可避免存在DNA污染。但對于某些痕量DNA敏感的RNA應用則必須去除殘留的DNA,對于這些應用,QIAGEN RNase-Free DNase Set(可選購)為QIAamp RNA純化流程提供簡(jiǎn)便的柱上DNase酶處理操作,去除殘留DNA。
Principle
QIAamp RNA Blood Mini Kit使用硅膠膜技術(shù)純化細胞RNA,無(wú)需苯酚-氯f(wàn)ang抽提。RNA特異性結合到QIAamp硅膠膜上,污染物流出。通過(guò)兩步高效洗滌*去除二價(jià)陽(yáng)離子和蛋白質(zhì)等PCR抑制劑,再用水或試劑盒中的緩沖液洗脫結合在離心柱上的純DNA。
QIAamp技術(shù)從新鮮的全血樣本或其他樣本來(lái)源中純化的總細胞RNA,可即時(shí)用于PCR和印跡實(shí)驗中。QIAamp樣本制備技術(shù)*得到驗證認可。
Procedure
QIAamp RNA Blood Mini Kit使用快速離心操作簡(jiǎn)化從血液中純化RNA的操作流程(參見(jiàn)"Procedure")。選擇性裂解紅細胞,離心收集白細胞。在高度變性條件下白細胞裂解,RNases很快失活。使用QIAshredder離心柱均質(zhì)化后,將樣本上樣到QIAamp離心柱??俁NA結合到QIAamp膜,污染物流出,在30–100 µl的無(wú)RNase水中洗脫殘留的純RNA(試劑盒提供),可即時(shí)用于多種下游應用。
Applications
QIAamp RNA Blood Mini Kit可從多至1.5 ml的新鮮人體全血中純化細胞RNA??梢允褂贸R幍目鼓齽┤鐧幟仕猁}、肝素或EDTA等穩定血液樣本。也可從組織樣本中純化得到總細胞RNA。