詳細介紹
Sino Biological SMM293-T1培養基,HEK293細胞培養基
產(chǎn)品描述:
SMM 293-TI培養基適用于貼壁、懸浮培養條件下的HEK293家族的HEK293EBNA及相關(guān)的細胞（如HEK293-F、HEK293H 、HEK293T、HEK293S、HEK293FT）的長(cháng)期生長(cháng)和瞬時(shí)轉染。
SMM 293-TI含有細胞生長(cháng)所需的全部營(yíng)養成份，無(wú)需添加任何添加物即可使用。其化學(xué)成分明確，主要包含細胞生長(cháng)所需的無(wú)機鹽， HEPES， 碳酸氫鈉， 必需和非必需氨基酸， 維生素， 酚紅， 微量元素， PluronicÒ F-68和其他無(wú)機物（注意：此培養基不包含抗生素以及血清）。 |
Sino Biological SMM293-T1培養基,HEK293細胞培養基
產(chǎn)品特點(diǎn):
| • HEK293細胞瞬時(shí)轉染培養基 | • 即用型*培養基，不用添加其他組分 |
| • 培養基批次間性能穩定，同類(lèi)產(chǎn)品性能更* | • 無(wú)動(dòng)物源組分，無(wú)血清，化學(xué)成分明確 |
| • 轉染前后無(wú)需更換培養基 | • 上千蛋白表達成功案例 |
| • 適用于瞬時(shí)轉染和穩定株轉染以及培養 | • 適用于細胞的懸浮培養和大規模的反應器培養 |
SMM293-T1培養基,HEK293細胞培養基
產(chǎn)品參數:
| 外觀(guān) | 澄清紅色溶液 | 適用細胞株 | HEK293EBNA及相關(guān)的細胞（如HEK293F、HEK293T、HEK293H 、HEK293S、HEK293FT） | | 滲透壓 | 275±10 mOsm/kg | 細胞接種密度 | 0.3-0.6×106 cells/mL | | pH值 | 6.0–6.5 | 倍增時(shí)間 | < 26 hrs（因細胞類(lèi)型、狀態(tài)影響而存在數值變化） | | 無(wú)菌檢測 | 無(wú)菌 | 細胞培養評價(jià) | 優(yōu)良 | | 內毒素 | < 10 EU/mL | 產(chǎn)品用途 | 僅用于科學(xué)研究，不推薦用于人類(lèi)或動(dòng)物的診斷和治療 | | 有效期 | 6個(gè)月 | 儲存條件 | 2-8 ℃，避光 |
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| SMM 293-TI培養基為澄清紅色透明液體，2~8℃避光保存，如發(fā)現培養基變得渾濁或出現沉淀，請勿使用。 |
產(chǎn)品使用效果:
| 細胞密度高 |
| SMM 293-TI培養基在HEK293T 的培養上更具優(yōu)勢。下圖從細胞生長(cháng)曲線(xiàn)以及細胞活率兩個(gè)方面，展示了四種培養基對HEK293T細胞的培養效果，SMM 293-TI培養基明顯具有不亞于國外的質(zhì)量。 |
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| 成功表達多種重組蛋白質(zhì) |
| SMM 293-TI 成功應用于多種重組蛋白質(zhì)的表達生產(chǎn)，獲得上千個(gè)高品質(zhì)的蛋白質(zhì)產(chǎn)品。其中一種Fc標簽融合蛋白的產(chǎn)量高達2.5g/L。 |
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產(chǎn)品使用方法:
| 細胞復蘇： |
- 迅速取出凍存的細胞，在37 ℃水浴條件下進(jìn)行解凍（可以在水中輕輕晃動(dòng)，時(shí)間控制在30s以?xún)龋?/li>
- 輕輕地混勻細胞并將融化的細胞全部移至50 mL無(wú)菌離心管中，逐滴加入10 mL預熱到37℃的培養基，離心換液（100 g，3 min）去除全部上清，加入293新鮮培養基重懸，使得細胞密度達到0.4~0.6×106cells/mL；
- 將細胞置于37℃，5%CO2，轉速為110~175rpm的恒溫搖床中進(jìn)行培養；
- 2-5天后通過(guò)人工或儀器測定細胞的密度以及活率，如果細胞密度達到1.0×106cells/mL，活率85%以上則可進(jìn)行傳代培養；
- 如果細胞密度低于1.0×106cells/mL，則建議對細胞進(jìn)行離心（100g，5min），然后重懸于20-30mL 的新鮮培養基中使得細胞密度為0.6×106cells/mL 左右，并繼續培養至細胞正常生長(cháng)則可進(jìn)行傳代培養。
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| 細胞轉染： |
| 在SMM 293-TI培養基中，用Sinofection®轉染試劑（貨號STF01），可以實(shí)現 HEK293 細胞的高轉染效率。具體細節可以參考Sinofection® 轉染試劑說(shuō)明書(shū)。 |
| 細胞馴化： |
| 懸浮的HEK293 cells幾乎不用馴化就可直接適應SMM 293-TI培養基。如果直接更換培養基失敗則推薦下面兩種方式來(lái)馴化HEK293細胞使其適應SMM 293-TI培養基：1）直接馴化；2）逐步馴化。 |
| 1）直接馴化： |
- 將培養在加有5~10%血清的傳統培養基或其他無(wú)血清培養基里的細胞，直接稀釋傳代到SMM 293-TI培養基中，細胞密度控制在0.3~0.4×106cells/mL；
- 將細胞置于37 ℃，5% CO2，轉速為110~175 rpm的恒溫搖床中進(jìn)行培養；
- 4~6天后對細胞培養液進(jìn)行稀釋?zhuān)ɑ蛘唠x心更換上清），保持稀釋?zhuān)ɑ蛘唠x心）后細胞密度為0.3~0.4×106cells/mL；
- 經(jīng)過(guò)在100%的 SMM 293-TI培養基中的幾次傳代培養，傳代后4~6天細胞的密度可以達到2~3×106cells/mL，細胞活率大于90%。這說(shuō)明細胞已經(jīng)*適應了SMM 293-TI培養基，之后進(jìn)行細胞的傳代培養時(shí)，細胞的起始密度可以降到0.2~0.3×106/ml左右。
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| 注意:如果直接馴化效果欠佳，可采用逐步馴化的方法。 |
| 2）逐步馴化： |
- 將培養在加有5~10%血清的傳統培養基或其他無(wú)血清培養基里的細胞，直接稀釋傳代到SMM 293-TI培養基中，細胞密度控制在0.3~0.4×106cells/mL，原培養基與SMM 293-TI培養基的比例為75:25；
- 將細胞置于37℃，5%CO2，轉速為110-175rpm的恒溫搖床中進(jìn)行培養；
- 4~6天后進(jìn)行傳代，如果細胞生長(cháng)狀態(tài)良好，且活率>90% 則傳代時(shí)原培養基與SMM 293-TI培養基的比例為50:50，細胞密度仍控制在0.3~0.4×106cells/mL。如細胞生長(cháng)慢，可離心上清，留20%原培養基，加入80% 的新鮮SMM 293-TI培養基繼續培養；
- 重復步驟3逐步增加SMM 293-TI培養基所占的比例（原培養基與SMM 293-TI培養基的比例為25:75至10:90）直到100%的SMM 293-TI培養基；
- 經(jīng)過(guò)在100%的 SMM 293-TI培養基中的幾次傳代培養，傳代后4~6天細胞的密度可以達到2~3×106cells/mL，細胞活率大于90%。這說(shuō)明細胞已經(jīng)*適應了SMM 293-TI培養基，之后進(jìn)行細胞的傳代培養時(shí)，細胞的起始密度可以降到0.2~0.3×106cells/mL。
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