血液DNA提取試劑盒實(shí)驗前準備及注意事項說(shuō)明
瀏覽次數：2217發(fā)布日期：2021-01-22
血液是與所有器官都有接觸的組織，蘊藏著(zhù)大量寶貴信息。早前人們開(kāi)發(fā)了血液活檢技術(shù)。用來(lái)分析循環(huán)腫瘤DNA、檢測血液中完整的腫瘤細胞和收集由腫瘤細胞釋放出的外泌體。還可以分析血液樣本中的腫瘤DNA，并對癌癥的基因特點(diǎn)進(jìn)行檢測。隨著(zhù)基因測序技術(shù)的快速發(fā)展，血液活檢技術(shù)以其迅速、便捷、損傷性小等優(yōu)點(diǎn)已經(jīng)逐步應用于臨床。用來(lái)監測腫瘤的術(shù)后反應，預測腫瘤復發(fā)。還能夠協(xié)助醫生發(fā)現患者的無(wú)任何癥狀的早期腫瘤。
血液DNA提取試劑盒可從新鮮或冷凍的抗凝血中提取人類(lèi)的或哺乳動(dòng)物的基因組DNA。整個(gè)提取過(guò)程不涉及酚等試劑，提取的血液基因組片段大，純度高，質(zhì)量穩定可靠，配合高通量的全自動(dòng)核酸提取儀，可實(shí)現DNA的自動(dòng)化提取。
血液DNA提取試劑盒在操作的時(shí)候，無(wú)需加熱，室溫(15-25℃)下即可進(jìn)行全程操作，提取結果可用于各種常規操作，包括酶切、PCR、熒光定量PCR、文庫構建、Southern雜交，芯片檢測、高通量測序等實(shí)驗。
實(shí)驗前準備及重要注意事項：
1、向蛋白酶K中加入用量(0.3ml/1.25ml)的蛋白酶K儲存液使其溶解，-20℃保存。配制好的蛋白酶K勿長(cháng)時(shí)間室溫放置，避免反復凍融，以免影響其活性。
2、所有離心操作均在室溫下完成。
3、血液樣品反復凍融，會(huì )導致提取的DNA的片段較小且提取量下降。所得基因組DNA也應盡可能避免反復凍融，以免降解。如果提取冷凍血液的基因組DNA，建議37℃水浴，迅速解凍后再進(jìn)行后續操作。
4、血液樣品的儲存：
1)短期保存：已加入抗凝劑的血液樣品可在2～8℃儲存到10天，對于某些實(shí)驗例如Southern雜交等，需要得到完整全長(cháng)的基因組DNA，請將血液樣品在2～8℃儲存不超過(guò)3天，此時(shí)基因組DNA的降解程度較輕。
2)長(cháng)期保存：已加入抗凝劑的血液請置于-70℃保存(如果提取的是高分子量的DNA，推薦使用EDTA作為抗凝劑)。
