化學(xué)發(fā)光檢測技術(shù)用途廣，具有非常高的靈敏度
瀏覽次數：2524發(fā)布日期：2020-01-13
化學(xué)發(fā)光分析技術(shù)是現代微量分析方法之一，由于其靈敏度高(可達10-18mol)、簡(jiǎn)便快速(計數1秒/管)、線(xiàn)性好(可兩點(diǎn)校準標準曲線(xiàn))、有效期長(cháng)(可達1年)、安全無(wú)害(無(wú)放射性和致畸物污染)等優(yōu)點(diǎn)而成為取代放免和酶聯(lián)的重要技術(shù)。
辣根過(guò)氧化酶使試劑中的發(fā)光物（luminol）氧化并發(fā)光，而試劑中含有增強劑這使得發(fā)光增強了1000倍。在免疫印跡中，將復雜的蛋白混合物經(jīng)sds-page分離，并轉移到固相膜上（如nc、pvdf）等，用于免疫學(xué)檢測，經(jīng)HRP標記的抗體與膜上的蛋白直接（標記一抗）或間接（標記二抗）反應。
在如今的Westernblot實(shí)驗中，化學(xué)發(fā)光檢測是常用的檢測方法。相對于顯色檢測和熒光檢測而言，它的靈敏度非常高，可達到飛克級（fg）。自從增強型化學(xué)發(fā)光（ECL）檢測問(wèn)世以來(lái)，這種方法就受到了*科研工作者的喜愛(ài)。
化學(xué)發(fā)光檢測通常使用的是辣根過(guò)氧化物酶（HRP）。它催化底物魯米諾（luminol）的氧化，同時(shí)生成光信號。這些信號可通過(guò)X光膠片的曝光來(lái)檢測，或直接在與化學(xué)發(fā)光兼容的CCD成像系統上獲取圖像。當然，后一種方式更方便，也更流行。
用途：
該底物試劑與堿性磷酸酶（ALP）混合后，堿性磷酸酶磷酸根水解后，底物立即發(fā)生分解反應釋放出光子，在特定的堿性磷酸酶濃度范圍內，釋放的光子數量與溶液中堿性磷酸酶的濃度成正比，所以可以用于堿性磷酸酶的定量檢測。
應用領(lǐng)域：
1堿性磷酸酶發(fā)光檢測；
2.ELISA化學(xué)發(fā)光檢測；
3.WB化學(xué)發(fā)光檢測；
4.其他酶聯(lián)化學(xué)發(fā)光反應檢測。
