lipo3000全新的轉染試劑
能轉染難處理細胞的通用型試劑:
在難轉染細胞類(lèi)型中具有廣泛的優(yōu)良性能
Lipofectamine? 3000試劑充分利用了我們先進(jìn)的脂質(zhì)體納米顆粒技術(shù),實(shí)現了超高轉染性能和可重復的試驗結果。其可在zui廣泛的難轉染和通用細胞類(lèi)型(圖1)中獲得非凡的轉染效率,同時(shí)提升細胞存活率。
圖1. Lipofectamine? 3000試劑勝過(guò)了Lipofectamine? 2000和FuGENE? HD試劑。每一種試劑均用于以96孔形式轉染EK 293、HeLa、LNCaP、HepG2和A549細胞系,并在轉染后48小時(shí)分析GFP表達情況。在所有五種細胞系中,Lipofectamine? 3000都表現出了高于Lipofectamine? 2000和FuGENE? HD的GFP轉染效率。
圖2. Lipofectamine? 3000操作手冊在保持易用性的同時(shí),還保持了優(yōu)異的性能和可靠性,適用于廣泛的細胞系類(lèi)型。 下載Lipofectamine? 3000操作手冊 > |
溫和低毒
在開(kāi)發(fā)Lipofectamine? 3000時(shí),我們對轉染過(guò)程的四個(gè)步驟進(jìn)行了優(yōu)化,同時(shí)結合了我們先進(jìn)的脂質(zhì)體納米顆粒技術(shù)。其所具有的超高轉染效率使得我們可以減少試劑劑量,降低處理細胞時(shí)的潛在毒性風(fēng)險。
圖3. 采用劑量的每種試劑,通過(guò)綠色熒光蛋白(GFP)表達載體,以96孔形式轉染HeLa細胞。在轉染后48小時(shí),采用流式細胞儀進(jìn)行分析,以測定百分比形式的轉染效率以及GFP表達強度。相對于Lipofectamine? 2000試劑和Lipofectamine? LTX試劑,Lipofectamine? 3000試劑表現出了更高的轉染效率和蛋白表達水平。 |
使用生物相關(guān)性的細胞系,可為您的研究課題提供相關(guān)性的答案。Lipofectamine? 3000試劑適用于zui廣泛的細胞譜系且兼具較高的轉染效率,使您可以非常靈活地在研究中應用自己選擇的細胞。
表1. 在不同的細胞系中,Lipofectamine? 3000試劑獲得了比Lipofectamine? 2000試劑更高的轉染效率。
細胞類(lèi)型 | Lipofectamine? 3000試劑轉染效率 | Lipofectamine? 3000相對于 Lipofectamine? 2000試劑蛋白表達水平提高倍數 |
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3T3 | 4 | |
4T1 | 2 | |
A431 | 2 | |
A549 | 3 | |
ACHN | 2 | |
bEnd.3 | 9 | |
BJ | 3 | |
BT-549 | 4 | |
C2C12 | 3 | |
C6 | 5 | |
Caco-2 | 2 | |
Caki-1 | 4 | |
CHO-K1 | 1 | |
CHO-S | 1 | |
COLO 205 | 4 | |
COS-7 | 4 |
轉染效率 (%): <30% 30-50% 51-79% >80%
Lipofectamine? 3000試劑與的Lipofectamine? 2000試劑相比,在多種組織來(lái)源的癌癥細胞中具有更高的轉染效率。在所選的癌癥細胞系中,使用Lipofectamine? 2000僅有25%被認為易于轉染(>50%的轉染效率),而使用Lipofectamine? 3000卻有60%的細胞系是易于轉染的。
圖4. 采用Lipofectamine? 2000試劑和Lipofectamine? 3000試劑將表達GFP的質(zhì)粒轉染至17種癌癥細胞系中,利用各試劑推薦的實(shí)驗方案,在24孔板中進(jìn)行轉染,每孔質(zhì)粒用量為0.5μg。轉染48小時(shí)后分析GFP表達情況。重復檢測3次,數據點(diǎn)顯示平均轉染效率 + 標準差。 |
Lipofectamine? 3000優(yōu)異的轉染效率配合Epi5? Episomal iPSC Reprogramming Kit保證了體細胞的重編程,無(wú)需電轉。
圖5. 結果來(lái)自于明場(chǎng)顯微鏡,(A) Lipofectamine? 3000和 (B) Neon? 轉染系統都表明在生成iPSC細胞群落時(shí)重編程成功了。使用堿性磷酸酶進(jìn)行末端染色。
改善基因組編輯結果
開(kāi)發(fā)Lipofectamine? 3000試劑,旨在突破輸送技術(shù)的界限,促進(jìn)生物相關(guān)系統內的新技術(shù)發(fā)展,例如基因組編輯。通過(guò)這一新試劑,GeneArt? TALs 和 CRISPR 可以靶向HepG2和U2OS細胞內的AAVS1位點(diǎn),同時(shí)表現出更佳的轉染效率、平均熒光強度和基因組切割效果。這些改進(jìn)之處有助于zui大限度減少繁重的下游工作,更便于進(jìn)行干細胞處理,增強轉基因在細胞基因組中的位點(diǎn)特異性插入。
下載應用說(shuō)明 >
圖6. GeneArt? TALs 和 CRISPRs的切割效率。TAL和CRISPR靶向(A) U2OS和(B) HepG2細胞系中的AAVS1位點(diǎn)。采用GeneArt?基因組切割檢測試劑盒分析切割效率。
圖7. 使用CRISPR載體時(shí)的轉染效率和蛋白表達。該載體含有OFP報告基因,并采用Lipofectamine? 2000或Lipofectamine? 3000轉染試劑轉染到(A) U2OS和(B) HepG2細胞系中。柱狀圖所示為報告基因的表達。圖片所示為相應細胞表達OFP的熒光圖。
轉染干細胞
圖8. 使用Lipofectamine ? 3000轉染H9干細胞 (A)或iPSC (B)。
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